Enews155 運用流式細胞儀及活體細胞影像來觀察細胞特性

出自KMU e-News

當前修訂版本

高雄醫學大學e快報 第155期　 研究資源整合發展中心 專題

運用流式細胞儀及活體細胞影像來觀察細胞特性

研究資源整合發展中心李曉婷．邱怡靜

本校研究資源整合發展中心目前有一台12色高階流式細胞儀(BD LSR II)，這是第一台可配置四根固定校準、氣冷式雷射的桌上型流式細胞儀，而本中心的LSR II目前配有三根雷射，包含Blue、Red和Violet laser，可同時分析12種不同的螢光參數。

這台儀器的核心設計主要是以新式數位化數據處理系統，來實現每秒鐘可處理一千萬次的高速分析，同時儀器的革新化脈衝處理技術，可以正確的區分實體組織樣本中聚集細胞群體，來大幅減少偽陽性的產生。

目前這台儀器最常運用於免疫細胞分析，如利用結合細胞表面抗原染色、細胞功能分析（例如：cell cycle, apoptosis）及細胞內細胞激素染色，以探討某群細胞之功能，尤其是當這群細胞比例低、不易分離或是in vitro所測功能無法反映in vivo時；也可運用於Signaling molecules之分析，利用帶有螢光之單株抗體分析細胞內之訊息傳遞，可同時偵測12種不同的訊息分子；另外，也可應用於Quantum dots，Quantum dots是特殊材質製成的奈米顆粒，因材質原因，可帶有螢光，與一般螢光染料不同是，其激發波長範圍（在紫光與紫外光間）寬廣，但emission波長很集中，因此不易有不同螢光之間的互相干擾，又因其不同顆粒大小，所發出之螢光波長不同，可以用來做multi- color染色，其應用範圍相當的廣泛。

此外，本中心活體細胞影像實驗室也備有一組 CellR螢光顯微系統及一台正立螢光顯微鏡。CellR除備有5顆高階物鏡(10X-100X)外，另備常用螢光濾片GFP、DAPI、RFP等。細胞樣品在適當處理下，可得到高解析度之螢光影像。CellR除一般倒立螢光顯微鏡功能外，其主要強大的功能為記錄活體細胞的即時影像變化(例如: 鈣離子)。且配置小型細胞培養箱，可控制實驗溫度及CO2比例，供長時間細胞影像記錄使用。正立螢光顯微鏡配備紅外光波段，主要應用於細胞神經生理學實驗。

記錄和觀測活細胞的生理變化已逐漸成為研究主流。至目前發展，利用不同的活細胞用螢光染劑(cell-permanent probe)，活細胞影像已廣泛地應用於鈣離子1-2、粒線體3、細胞週期4等研究上。 目前高醫大在活體細胞方面的研究，在影像專家吉岡 亨客座教授的帶領下， 著重於鈣離子影像研究。更有校內研究利用本實驗室資源，著手發表實驗成果於期刊生物醫學。將來，活體細胞影像實驗室期望在現有的技術與資源下，協助更多校內研究者在細胞生物學之研究上有進一步的突破。

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